ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА УДВОЕННЫХ ГАПЛОИДОВ КАБАЧКА (CUCURBITA PEPO L.)

Из девяти отозвавшихся в культуре неопыленных семяпочек образцов кабачка в 2015-2017 годах было получено 147 новых генотипов. Для оценки уровня плоидности полученных растенийрегенерантов R0 кабачка необходимо проводить цитолог ический анализ. Малый размер митотических хромосом и их относительно большое количество в роде Cucurbita делает их трудными для точного подсчета, даже несмотря на то, что они, как правило, хорошо разделены. В результате проведенной работы была подобрана оптимальная методика окрашивания хромосом кабачка с использованием модернизированного нами пропионно-лакмоидного метода. При приготовлении давленных препаратов использовали меристемы стебля и кончиков корней. Кабачок оказался трудным в цитологическом плане объектом ввиду малой частоты митозов и небольшого числа метафаз с хорошим разбросом хромосом. В результате удалось получить микрофотографии хромосом кабачка C. pepo subsp. brevicaulis var. giraumons Duch и отдаленного гибрида (селекционный образец №37) между кабачком сорта Корнишонный и твердокорой тыквой C. pepo subsp. longicaulis Greb. var. pepo, а также полученных из них удвоенных гаплоидов. Несмотря на достаточно мелкие размеры (около 2 мкм), хромосомы на полученных микрофотографиях достаточно четко видны. Практически все проанализированные растения-регенеранты, успешно прошедшие этап адаптации к условиям in vivo, оказались удвоенными гаплоидами 2n = 2х = 40 и в последующем успешно завязали семена при самоопылении. Около 20% из проанализированных растений R0 были миксоплоидами, предположительно гаплоидных растений было 7%.

1. Вавилов Н.И. (1925) О междуродовых гибридах дынь, арбузов и тыкв. Труды по прикладной ботанике и селекции. Т.14. Вып. 1. C.1-35.

2. Домблидес Е.А., Шмыкова Н.А., Заячковская Т.В., Химич Г.А., Коротцева И.Б., Кан Л.Ю., Домблидес А.С. Получение удвоенных гаплоидов в культуре неопыленных семяпочек кабачка (Сucurbita pepo L.). В сборнике: Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира (физиолого-биохимические, эмбриологические, генетические и правовые аспекты). Материалы VII Международной научно-практической конференции, посвященной 30-летию отдела биотехнологии растений Никитского ботанического сада. 2016. С.28-29.

3. Домблидес Е.А., Шмыкова Н.А., Шумилина Д.В., Заячковская Т.В., Минейкина А.И., Козарь Е.В., Ахраменко В.А., Шевченко Л.Л., Кан Л.Ю., Бондарева Л.Л., Домблидес А.С. Технология получения удвоенных гаплоидов в культуре микроспор семейства капустные. ФГБНУ «Всероссийский НИИ селекции и семеноводства овощных культур». Москва, 2016.

4. Домблидес Е.А., Шмыкова Н.А., Химич Г.А., Коротцева И.Б., Домблидес А.С. ОБРАЗОВАНИЕ АНОМАЛЬНЫХ ЦВЕТКОВ В ПОТОМСТВЕ УДВОЕННЫХ ГАПЛОИДОВ КАБАЧКА (CUCURBITA PEPO L.). Овощи России. 2018;(5):13-17. DOI:10.18619/2072-9146-2018-5-13-17

5. Кан Л.Ю. Цитологические исследования в селекционной работе на основе межвидовой гибридизации в роде Allium L. «Хромосомы и эволюция». Симпозиум памяти Г.А.Левитского. Санкт-Петербург, 2008. С.53-55.

6. Паушева З. П. Практикум по цитологии растений / З.П. Паушева. – Изд. 4-е, перераб. и доп. – Москва: Агропромиздат, 1988. 271 с.

7. Пухальский В.А., Соловьев А.А., Бадаева Е.Д., Юрцев В.Н. Практикум по цитологии и цитогенетике растений. М.: Изд-во "КолосС". 2007.

8. Соловьёва Л.В. Практикум по цитологии плодовых растений. – М.: Изд-во МГУ,1982. – 54 с.

9. Тимин Н.И., Пышная О.Н., Агафонов А.Ф., Мамедов М.И., Титова И.В., Кан Л.Ю., Логунова В.В., Романов В.С., Шмыкова Н.А., Тимина Л.Т., Гуркина Л.К., Джос Е.А., Супрунова Т.П., Кривошеев С.М., Енгалычева И.А. Межвидовая гибридизация овощных растений (Allium L. – лук, Daucus L. – морковь, Capsicum L. – перец). Москва, 2013.

10. Шмыкова Н.А., Супрунова Т.П. Индукция гиногенеза в культуре in vitro неопыленных семяпочек Cucumis sativus L. Гавриш. 2009. № 4. С.40-44.

11. Шмыкова Н.А., Шумилина Д.В., Кушнерёва В.П., Химич Г.А. Индукция гиногенеза в культуре неопыленных семяпочек тыквы. Овощи России. 2011. №1 (10). С.28-31.

12. Шмыкова Н.А., Химич Г.А., Коротцева И.Б., Домблидес Е.А. (2015) Перспективы получения удвоенных гаплоидов растений семейства Сucurbitaceae. Овощи России. 2015;(3-4):28-31 https://doi.org/10.18619/2072-9146-2015-3-4-28- 31

13. Chen, J., Staub, J. E., & Jiang, J. (1998). Genetic Resources and Crop Evolution, 45(4), 301–305. doi:10.1023/a:1008603608879

14. Domblides E.A., Shmykova N.A., Shumilina D.V., Zayachkovskaya T.V., Vjurtts T.S., Kozar E.V., Kan L.Yu., Romanov V.S., Domblides A.S., Pivovarov V.F., Soldatenko A.V. Biotechnological approaches for breeding programs in vegetable crops. Agrosym 2017. Book of proceedings. 2017. P.452-460.

15. Jeffrey C. (1980). A review of the Cucurbitaceae. Botanical Journal of the Linnean Society, 81(3), 233–247. doi:10.1111/j.1095-8339.1980.tb01676.

16. Kurtar E.S., Balkaya A. (2010) Production of in vitro haploid plants from in situ induced haploid embryos in winter squash (Cucurbita maxima Duchesne ex Lam.) via irradiated pollen. Plant Cell Tissue Org Cult 102(3):267–277.

17. Metwally E.I., Haroun S.A., El-Fadly G.A. (1996) Interspecific cross between Cucurbita pepo L. and Cucurbita martinezii through in vitro embryo culture. Euphytica 90: 1–7.

18. Suprunova T., Shmykova N. In vitro induction of haploid plants in unpollinated ovules, anther and microspore culture of Cucumis sativus // Cucurbitaceae 2008. Proceedings of the IXth EUCARPIA meeting on genetics and breeding of Cucurbitaceae. 21-24 May 2008 Avignon, France. P.371-374.

19. Varghese B.M. (1973) Studies on the cytology and evolution of south Indian Cucurbitaceae. Ph.D. Thesis Kerala Univ., India.

20. Whitaker, T.W. (1933). Cytological and Phylogenetic Studies in the Cucurbitaceae. Botanical Gazette, 94(4), 780–790. doi:10.1086/334347

21. Whitaker T.W., Davis G.N. (1962) Cucurbits. Interscience Pub., Inc.,New York.