<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">ovoshchi</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Овощи России</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Vegetable crops of Russia</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">2072-9146</issn><issn pub-type="epub">2618-7132</issn><publisher><publisher-name>Федеральный научный центр овощеводства</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.18619/2072-9146-2017-5-25-30</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">ovoshchi-441</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>СЕЛЕКЦИЯ И СЕМЕНОВОДСТВО СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>BREEDING AND SEED PRODUCTION OF AGRICULTURAL CROPS</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>ПОЛУЧЕНИЕ DH-РАСТЕНИЙ В КУЛЬТУРЕ МИКРОСПОР МОРКОВИ</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>PRODUCTION OF DH-PLANTS IN CULTURE OF ISOLATED MICROSPORE IN CARROT</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Вюртц</surname><given-names>Т. С.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Vjurtts</surname><given-names>T. S.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Младший научный сотрудник лаборатории селекции и семеноводства столовых корнеплодов.</p><p>143072, Московская обл., Одинцовский р-н, п. ВНИИССОК, ул. Селекционная, д. 14 </p></bio><bio xml:lang="en"><p>Junior Researcher, Laboratory of Root Crop Breeding and seed Production.</p><p>Selectionaya St. 14, VNIISSOK, Odintsovo region, Moscow oblast, 143072</p></bio><email xlink:type="simple">tajtzha@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Домблидес</surname><given-names>Е. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Domblides</surname><given-names>E. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Заведующий лабораторией биотехнологии, кандидат сельскохозяйственных наук.</p><p>143072, Московская обл., Одинцовский р-н, п. ВНИИССОК, ул. Селекционная, д. 14 </p></bio><bio xml:lang="en"><p>Ph.D. in Agriculture, Head of Laboratory of Biotechonology.</p><p>Selectionaya St. 14, VNIISSOK, Odintsovo region, Moscow oblast, 143072</p></bio><email xlink:type="simple">Edomblides@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Шмыкова</surname><given-names>Н. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Shmykova</surname><given-names>N. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Начальник отдела ОФР, доктор сельскохозяйственных наук, проф. по специальности биотехнология.</p><p>634021, Томск, ул. Елизаровых, д. 79/4</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Director of OFR Department, Doctor of Sciences, Professor in Biotechnology.</p><p>Elisarovykh St. 79/4, Tomsk, 634021</p></bio><email xlink:type="simple">shmykovanat@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Федорова</surname><given-names>М. И.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Fedorova</surname><given-names>M. I.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Доктор сельскохозяйственных наук, профессор.</p><p>143072, Московская обл., Одинцовский р-н, п. ВНИИССОК, ул. Селекционная, д. 14 </p></bio><bio xml:lang="en"><p>Doctor of Sciences in Agriculture, Professor.</p><p>Selectionaya St. 14, VNIISSOK, Odintsovo region, Moscow oblast, 143072</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Кан</surname><given-names>Л. Ю.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kan</surname><given-names>L. Ju.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Старший научный сотрудник лаборатории генетики и цитологии, кандидат сельскохозяйственных наук.</p><p>143072, Московская обл., Одинцовский р-н, п. ВНИИССОК, ул. Селекционная, д. 14 </p></bio><bio xml:lang="en"><p>Ph.D. in Agriculture, Senior Researcher in Laboratory of Genetics and Cytology.</p><p>Selectionaya St. 14, VNIISSOK, Odintsovo region, Moscow oblast, 143072</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Домблидес</surname><given-names>А. С.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Domblides</surname><given-names>A. S.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Заведующий лабораторией генетики и цитологии, кандидат сельскохозяйственных наук.</p><p>143072, Московская обл., Одинцовский р-н, п. ВНИИССОК, ул. Селекционная, д. 14 </p></bio><bio xml:lang="en"><p>Ph.D. in Agriculture, Head of Laboratory of Genetics and Cytology.</p><p>Selectionaya St. 14, VNIISSOK, Odintsovo region, Moscow oblast, 143072</p></bio><email xlink:type="simple">Edomblides@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>ФГБНУ Федеральный научный центр овощеводства</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>FSBSI, Federal Scientific Vegetable Centre</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-2"><aff xml:lang="ru"><institution>ООО «Ифар»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>LLC Iphar</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2017</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>05</day><month>02</month><year>2018</year></pub-date><volume>0</volume><issue>5</issue><fpage>25</fpage><lpage>30</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Вюртц Т.С., Домблидес Е.А., Шмыкова Н.А., Федорова М.И., Кан Л.Ю., Домблидес А.С., 2018</copyright-statement><copyright-year>2018</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Вюртц Т.С., Домблидес Е.А., Шмыкова Н.А., Федорова М.И., Кан Л.Ю., Домблидес А.С.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Vjurtts T.S., Domblides E.A., Shmykova N.A., Fedorova M.I., Kan L.J., Domblides A.S.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.vegetables.su/jour/article/view/441">https://www.vegetables.su/jour/article/view/441</self-uri><abstract><p>Целью данного исследования было изучить факторы, влияющие на процесс эмбриогенеза в культуре изолированных микроспор in vitro, оптимизировать существующие протоколы и получить удвоенные гаплоиды моркови (DH-растения). Из 10 изученных в 2017 году сортообразцов нам удалось получить эмбриоиды у 8 сортообразцов с использованием 5 различных вариантов питательных сред. Наибольший выход эмбриоидов наблюдался у селекционного образца 7кт (84 эмбриоида на чашку Петри). Было отмечено, что оптимальными для введения в культуру являются бутоны, содержащие преимущественно микроспоры на поздней вакуолизированной стадии развития. Первые деления в культуре микроспор моркови под микроскопом были обнаружены уже через 3 дня после начала культивирования. На 40 сутки эмбриоиды были хорошо сформированы и видны невооруженным глазом. Было отмечено, что если продолжать культивировать эмбриоиды на питательной среде с 13% сахарозой более 60 суток, то активно начинается процесс образования вторичных эмбриоидов. В связи с этим мы рекомендуем эмбриоиды на сердцевидной стадии развития сразу же переносить в отдельные пробирки на регенерационную среду с 2% сахарозой, чтобы вести правильный учет образовавшихся эмбриоидов. Мы провели изучение влияния факторов генотипа и питательной среды, а также их совместного действия на образование эмбриоидов у 8 генотипов моркови на 5 различных питательных средах. Проведенный двухфакторный дисперсионный анализ показал, что генотип является главным фактором определяющим образование эмбриоидов из микроспор, а совместное действие обоих факторов также определяет количество образовавшихся эмбриоидов. Прямым подсчетом числа хромосом в меристематических клетках и с использованием метода подсчета хлоропластов в замыкающих устьичных клетках было установлено, что почти все полученые растения были удвоенными гаплоидами.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>The main goals of the research were to study the factors affecting on the process of embryogenesis in culture of isolated microspores, optimize the existing protocols, and finally produce the doubled haploid plants in carrot (DH-plants). Out of 10 carrot accessions tested in 2017 the embyoids were obtained in 8 carrot accessions with the use of 5 different media. The highest yield of embyoids was obtained in accessions 7kt (84 embryoids per Petri dish). It was shown that       optimal                explants              were     buds      containing microspores at late vacuolated uninucleate stage. The first divisions in microspores were seen in 3 days of cultivation. After 40 days, the welldeveloped embryoids can be observed by naked eye. It was also shown that further cultivation of these embryoids on medium with 13% agarose over 60 days provoked the active secondary embryoid formation. Owing to this, it is recommended to place the embryoids at heart-shaped stages on another regeneration medium supplied with 2 % of agarose, enabling to register correctly the number of well-formed embryoids. We carried out the study on influence of such factors as genotype and composition of medium, and their combination on embryoid formation in 8 genotypes on 5 various media. ANOVA analysis showed that the plant genotype was the main factor causing the embryoid formation, whereas the effect of both factors had an impact on the number of embryoids developed. The counting the chromosome number in meristem cells and also observation of chloroplast number in stoma guard cells enabled to reveal that most of the plants produced were the doubled haploids</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>Daucus carota L.</kwd><kwd>DH-технологии</kwd><kwd>культура изолированных микроспор</kwd><kwd>андрогенез</kwd><kwd>регенерация растений</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>Daucus carota L.</kwd><kwd>DH-technology</kwd><kwd>culture of isolated microspores androgenesis</kwd><kwd>plant regeneration</kwd></kwd-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Бунин М.С., Литвинова М.К., Мешков А.В. Морковь Daucus carota L. (Биологические особенности, селекция и семеноводство, агротехника возделывания). М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2004. – 164 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Bunin M.S., Litvinova M.K., Meshkov A.V. Morkov' Daucus carota L. (Biologicheskie osobennosti, selekciya i semenovodstvo, agrotekhnika vozdelyvaniya). M.: FGNU «Rosinformagrotekh», 2004. – 164 s.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Домблидес, А.С. Разработка лабораторной технологии получения гиногенных растений моркови in vitro: автореферат дис. к. с.-х.н.М., 2001. 23 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Domblides, A.S. Razrabotka laboratornoj tekhnologii polucheniya ginogennyh raste-nij morkovi in vitro: avtoreferat dis. k. s.-h.n.M., 2001. 23 s.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Тюкавин Г.Б., Шмыкова Н.А., Монахова М.А. Цитология эмбриогенеза в культуре пыльников моркови // Физиология растений. 1999. Т. 46. № 6. С. 876-883.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Tyukavin G.B., SHmykova N.A., Monahova M.A. Citologiya ehmbriogeneza v kul'ture pyl'nikov morkovi // Fiziologiya rastenij. 1999. T. 46. № 6. S. 876-883.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Тюкавин, Г.Б. Биотехнологические основы селекционной технологии моркови. М., 2007.539 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Tyukavin, G.B. Biotekhnologicheskie osnovy selekcionnoj tekhnologii morkovi. M., 2007.539 s.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Чистова А.В. Совершенствование in vitro технологии получения удвоенных гаплоидов для селекции F1 гибридов моркови на основе самонесовместимости: автореферат дис. к. с.-х.н., М., 2015. 18 с</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">CHistova A.V. Sovershenstvovanie in vitro tekhnologii polucheniya udvoennyh gaploidov dlya selekcii F1 gibridov morkovi na osnove samonesovmestimosti: avtoreferat dis. k. s.-h.n., M., 2015. 18 s</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Шмыкова, Н.А. Разработка системы биотехнологических методов, направленных на ускорение селекционного процесса овощных культур: дис. … д-ра с-х. Наук: 06.01.05, 03.00.23. М., 2006.365 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">SHmykova, N.A. Razrabotka sistemy biotekhnologicheskih metodov, napravlennyh na uskorenie selekcionnogo processa ovoshchnyh kul'tur: dis. … d-ra s-h. Nauk: 06.01.05, 03.00.23. M., 2006.365 s.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit7"><label>7</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Соловьёва Л.В. Практикум по цитологии плодовых растений – М.: Изд-во МГУ,1982. – 54 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Solov'yova L.V. Praktikum po citologii plodovyh rastenij – M.: Izd-vo MGU,1982. – 54 s.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit8"><label>8</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Alexander M.P. Differential staining of aborted and non$aborted pollen. // Stain technol. 1969. V.44. №3. P.117-122</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Alexander M.P. Differential staining of aborted and non$aborted pollen. // Stain technol. 1969. V.44. №3. P.117-122</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit9"><label>9</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Andersen S.B. Anther Culture in Carrot // Hereditas Suppl. 1985. V.3, N 12.-P. 132.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Andersen S.B. Anther Culture in Carrot // Hereditas Suppl. 1985. V.3, N 12.-P. 132.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit10"><label>10</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Gуrecka K, Krzyżanowska D, Gуrecki R (2005) The influence of several factors on the effi-ciency of androgenesis in carrot. J of Appl Genet 46(3):265–269.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Gуrecka K, Krzyżanowska D, Gуrecki R (2005) The influence of several factors on the effi-ciency of androgenesis in carrot. J of Appl Genet 46(3):265–269.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit11"><label>11</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Gуrecka, K., U. Kowalska., D. Krzyżanowska. W. Kiszezak. Obtaining carrot (Daucus caro-ta L.) plants in isolated microspore cultures //J Appl Genet, 2010. V. 51.P. 141-147.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Gуrecka, K., U. Kowalska., D. Krzyżanowska. W. Kiszezak. Obtaining carrot (Daucus caro-ta L.) plants in isolated microspore cultures //J Appl Genet, 2010. V. 51.P. 141-147.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit12"><label>12</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Huguette S., Maryse Т., Alain C. The ultrastructure of micropropagated and greenhouse rose plant stomata // Plant Cell, Tiss. Org. Cult. 1993. V.32, N 2. P. 227-233.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Huguette S., Maryse Т., Alain C. The ultrastructure of micropropagated and greenhouse rose plant stomata // Plant Cell, Tiss. Org. Cult. 1993. V.32, N 2. P. 227-233.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit13"><label>13</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Li J.-R., Zhuang F.Y., Ou Ch.-G., Hu H., Zhao Z.-W., Mao J.-H. Microspore embryogene-sis and production of haploid and doubled haploid plants in carrot (Daucus carota L.). //Plant Cell Tiss. Organ Cult. 2013. V. 112 P. 275-287.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Li J.-R., Zhuang F.Y., Ou Ch.-G., Hu H., Zhao Z.-W., Mao J.-H. Microspore embryogene-sis and production of haploid and doubled haploid plants in carrot (Daucus carota L.). //Plant Cell Tiss. Organ Cult. 2013. V. 112 P. 275-287.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit14"><label>14</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Lichter R. Induction of haploid plants from isolated pollen of Brassica napus. Z. Pflanzenphysiol., 1982, 105: 427-434.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Lichter R. Induction of haploid plants from isolated pollen of Brassica napus. Z. Pflanzenphysiol., 1982, 105: 427-434.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit15"><label>15</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Masuda K., Kikuta Y., Okazava Y. A Revision of the Medium for Somatic Embryogenesis in Carrot Suspension Culture // J. Fac. Agr. Hokkaido Univ. 1981. -Vol. 60. P.—183—193.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Masuda K., Kikuta Y., Okazava Y. A Revision of the Medium for Somatic Embryogenesis in Carrot Suspension Culture // J. Fac. Agr. Hokkaido Univ. 1981. -Vol. 60. P.—183—193.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit16"><label>16</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, 1962, 15: 473-497 (doi: 10.1111/j.1399-3054.1962.tb08052.x).</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, 1962, 15: 473-497 (doi: 10.1111/j.1399-3054.1962.tb08052.x).</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit17"><label>17</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Matsubara S., Dohya N, Murakami K, Nishio T, Dore C Callus formation and regeneration of adventitious embryos from carrot, fennel and mitsuba microspores by anther and isolated microspore cultures // Acta Hortic, 1995.V. 392. P. 129–137.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Matsubara S., Dohya N, Murakami K, Nishio T, Dore C Callus formation and regeneration of adventitious embryos from carrot, fennel and mitsuba microspores by anther and isolated microspore cultures // Acta Hortic, 1995.V. 392. P. 129–137.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
